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簡述干粉培養基使用過程中的常見問題相應解決方法

更新時間:2025-11-05點擊次數:30
   干粉培養基是微生物實驗的基石,廣泛應用于食品檢測、臨床診斷、藥品無菌檢查等領域。然而,在實際使用中,常因操作疏忽、環境偏差或儲存不當,導致培養失敗、結果異常甚至誤判,這些問題悄然影響實驗可靠性。識別并科學應對干粉培養基的這些問題,是保障微生物檢測準確性的關鍵。

 


  問題一:培養基不凝固或凝膠強度弱
  原因:瓊脂量不足、滅菌時間過長導致降解、水質硬度過高(鈣鎂離子干擾凝膠形成)。
  對策:嚴格按說明書稱量瓊脂(通常15-20g/L);避免反復高壓滅菌;使用去離子水或蒸餾水配制。若已配制,可補加1-2%瓊脂重新滅菌(僅限未接種前)。
  問題二:培養基顏色異常(如變黃、變褐)
  原因:滅菌溫度過高或時間過長導致糖類焦化;干粉受潮氧化;pH調節不當。
  對策:含糖培養基采用115℃、20分鐘滅菌;檢查干粉是否結塊變色,過期勿用;滅菌前精確調pH至標準范圍(如營養瓊脂pH7.2±0.2)。
  問題三:目標菌不生長或生長微弱
  原因:培養基成分失效(如抗生素降解)、滅菌過度破壞營養、接種量不足或菌種活性差。
  對策:新批次培養基必須做適用性檢查(接種標準菌株驗證生長);避免反復凍融或長期高溫存放干粉;確保接種物處于對數生長期。
  問題四:非目標菌大量生長(選擇性失效)
  原因:選擇性抑制劑(如膽鹽、抗生素)添加量不足、滅菌破壞或pH偏離。
  對策:嚴格按配方添加抑制劑;熱敏成分采用過濾除菌后無菌加入;驗證培養基對非目標菌的抑制率(如SS瓊脂應抑制大腸桿菌)。
  問題五:平板表面大量冷凝水
  原因:滅菌后未及時搖勻冷卻、倒平板后未充分干燥、冰箱儲存時溫差大。
  對策:滅菌后稍冷卻(約50℃)再倒平板;倒置平板于超凈臺中吹干30分鐘;冷藏前用封口膜密封,回溫后再打開。

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